ESTABELECIMENTO DE UM PROTOCOLO PARA TRANSPORTE REFRIGERADO DE TESTÍCULOS DE CATETOS (Pecari tajacu)

Resumo

Embora muito se fale da necessidade de formação de biobancos para conservação de espécies selvagens, são ainda escassos os laboratórios especializados nessa temática, sendo necessário o desenvolvimento de técnicas para salvaguardar o germoplasma de animais importantes que venham subitamente a óbito. Assim, objetivou-se estabelecer um protocolo para o transporte refrigerado de amostras de testículo, utilizando o cateto (Pecari tajacu) como modelo experimental. Após aprovações cabíveis (CEUA 41/2024; SISBIO 72170-3), foram eutanasiados seis catetos adultos, cujos testículos (n = 12) foram coletados, examinados, e distribuídos por randomização em três grupos: 1) avaliado imediatamente (n = 4), 2) refrigerado por 24 horas (n = 4) e 3) refrigerado por 48 horas (n = 4), utilizando-se dispositivo comercial de transporte a 5°C. Testículos frescos e refrigerados foram fragmentados e avaliados sob microscopia de fluorescência quanto à viabilidade tecidual (sondas iodeto de propídio e Hoechst 33342) e apoptose celular (sondas laranja de acridina e brometo de etídio), sendo classificadas em viáveis, sem apoptose, apoptose precoce, apoptose tardia e necróticas. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão, analisados pelo teste de Kruskal-Wallis, seguido do teste de Dunn para comparação de médias (P < 0,05). O controle fresco apresentou 92,75 ± 0,75% de viabilidade tecidual com 90,75 ± 3,03% de células sem apoptose. Tanto a viabilidade celular (71,00 ± 8,82%), quanto o padrão sem apoptose (66,50 ± 9,94%) foram conservados efetivamente por até 24 horas (P > 0,05); porém,  verificou-se leve redução desses padrões às 48 horas (43,25 ± 8,99% e 56,75 ± 5,12%) (P < 0,05), comparando-se ao grupo fresco. Os padrões de viabilidade, bem como as análises referentes diferentes manifestações de apoptose em todos os grupos são detalhados na Tabela 1. Os resultados indicam que o tecido testicular de catetos armazenado a 5 °C mantém sua viabilidade com eficácia por até 24 horas, tempo inferior ao observado para bovinos cuja viabilidade é mantida por até 48 h (1). A divergência dos resultados entre os estudos evidencia características inerentes à espécie que podem ser influenciadas pelo tempo e temperatura, apontando a necessidade de aperfeiçoamento do protocolo. Em todo caso, ressalta-se que 24 h seria tempo suficiente para o transporte de amostras biológicas entre regiões distantes por via aérea, mesmo em um país de dimensões continentais como o Brasil. Neste sentido, conclui-se que o tecido testicular de catetos pode ser efetivamente transportado sob refrigeração a 5 °C por até 24 h. Entretanto, mesmo após 48 h, a taxa de viabilidade celular encontrada ainda permitiria o aproveitamento de células testiculares para a composição de biobancos. Este trabalho inova ao oferecer um protocolo efetivo para a recuperação e processamento de amostras de indivíduos de alto valor biológico que eventualmente venham a óbito nos centros de conservação.