AVALIAÇÃO E ARMAZENAMENTO DE SÊMEN CRIOPRESERVADO DE ONÇA-PARDA (Puma concolor) DA CAATINGA: RELATO DE CASO

Resumo

Na Caatinga, a diminuição das áreas ocupáveis pela onça-parda tem sido expressiva, com ausência de P. concolor na maior parte do bioma e, considerando a crise climática, projeções indicando futuros cenários em que a manutenção das populações remanescentes a médio e longo prazo pode ser inviável (1). Nesse contexto, as ferramentas de conservação ex situ podem auxiliar na preservação e no intercâmbio de fontes genéticas dispensando a mobilização de animais, através das biotecnologias reprodutivas. Este trabalho teve como objetivo relatar a coleta e avaliação de sêmen em onça-parda da Caatinga, com subsequente criopreservação de sêmen para armazenamento em biobanco. Um animal proveniente do Zoológico São Francisco, localizado no Santuário do município de Canindé, Ceará (Latitude: 4° 21′ 29″ Sul, Longitude: 39° 18′ 7″ Oeste), adulto, com idade desconhecida e peso médio de 68kg, foi capturado de seu recinto com puçá e contido quimicamente pela associação de dexmedetomidina (0,04mg/kg, IM) com cloridrato de cetamina (5mg/kg, IM). A contenção fazia parte do manejo regular do zoológico, com fins de avaliação clínica por parte da equipe da Unidade, sendo então aproveitada a situação para os procedimentos reprodutivos. Após avaliação e constatado que o animal estava clinicamente saudável, foi realizada sondagem uretral e lavagem vesical com solução NaCl 0,9% para coleta de sêmen por eletroejaculação (2) (Figura 1), sendo o ejaculado avaliado quanto ao volume, coloração, concentração, motilidade, vigor, vitalidade e morfologia sob microscopia de luz. Posteriormente, a amostra foi diluída em meio TRIS-Citrato-Gema de ovo e submetida a curva de refrigeração (-0,55ºC/min por 60min até 4ºC, e estabilização por 60min) (3), sendo então adicionado Glicerol como crioprotetor a uma concentração final de 5% (4). As amostras foram envasadas em quatro palhetas de 0,25ml, expostas a vapor de nitrogênio líquido por 5 minutos, imersas e armazenadas em botijão criobiológico. O ejaculado fresco apresentou 1,8mL de volume, coloração translúcida, com 160×106 espermatozoides/mL, 75% de motilidade total, 4 de vigor, 58% de vitalidade e 74% de espermatozoides morfologicamente normais. Após a descongelação, foi observada redução expressiva dos parâmetros espermáticos (Tabela 1), o que também tem sido relatado em outros estudos em onças-pardas usando diluentes a base de TRIS e gema de ovo, em que os valores de motilidade espermática atingem perdas funcionais de até 60% (3). Em gatos domésticos, o uso de diferentes meios de congelação, como o meio a base de lecitina de soja, associado a mudanças na curva de congelação e ao tempo de exposição ao glicerol antes da imersão em nitrogênio líquido, promoveram melhores resultados pós-descongelação (4). Isso demonstra a necessidade do aprimoramento dos protocolos de criopreservação em onças-pardas para resultados otimizados, os quais ainda têm sido incipientes na espécie. Em conclusão, este relato ressalta a importância da parceria entre zoológicos e laboratórios especializados em reprodução, o que permite a coleta de materais biológicos durante os manejos regulares das Unidades, sendo valiosos no desenvolvimento de pesquisas e na formação de biobancos, e abre perspectivas para estudos mais amplos visando a otimização dos protocolos de criopreservação espermática em onças-pardas com foco conservacionista.