ANÁLISE DE BIOINFORMÁTICA DE Enterobacter cloacae PRODUTOR DE BETA-LACTAMASES ISOLADAS DE PAPAGAIO (Amazona aestiva)

Resumo

Introdução: O uso de antimicrobianos vem contribuindo para a disseminação de genes de resistência, tanto no ambiente quanto em animais (1,2). Infecções por bactérias produtoras de betalactamases são consideradas de alto risco, pois comprometem a saúde e o bem-estar das aves, e representam um desafio terapêutico (3). Enterobacter cloacae pode ser responsável por uma variedade de infecções em aves, incluindo pneumonia e sepse, sendo de difícil tratamento em função das características oportunistas do agente e do perfil multirresistente (4). O objetivo deste estudo foi caracterizar uma estirpe multirresistente de Enterobacter cloacae, isolada de um papagaio-verdadeiro, por meio de ferramentas de bioinformática. Material e Métodos: Durante a necropsia de um papagaio (Amazona aestiva) provindo de um Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS), foram coletadas amostras de sangue e órgãos, posteriormente cultivadas em caldo BHI (Brain Heart Infusion Broth) com 30 μg de cefotaxima (CTX), a 37°C por 24 horas. As colônias de Enterobacter cloacae, isoladas de traqueia e de sangue, foram triadas pelo teste de disco difusão em ágar. A cepa denominada RG264, isolada de sangue, foi considerada multirresistente e apresentou resistência a todos os betalactâmicos testados, incluindo o clavulânato, sendo selecionada para o sequenciamento do genoma completo. A extração de DNA foi realizada com o kit Pure LINK (Promega) e o sequenciamento utilizou a plataforma MiSeq (Illumina, Inc., San Diego, CA). Os contigs foram curados através da ferramenta Galaxy Europe, permitindo a análise dos genes codificadores de resistência e MLST. Resultados: A leitura dos contigs teve uma cobertura de 30,6x, satisfatória para a detecção de genes de resistência. A cepa RG264 foi identificada como Enterobacter cloacae ST527, portadora dos genes de resistência oqxB; oqxA, blaACT-16, blaTEM-1B; drfA26; sul2; tet(D); fosA. Discussão: o perfil genotípico encontrado caracteriza o isolado como multirresistente, capaz de resistir à tetraciclina, cloranfenicol, sulfa+trimetoprim, quinolonas e fosfomicina. Em relação aos betalactâmicos, foi encontrada uma betalactamase de espectro restrito (blaTEM-1B), associada a uma AmpC plasmidial (blaACT-16). Nesse caso o fenótipo de resistência esperado inclui a resistência às penicilinas, cefalosporinas de 1ª, 2ª e 3ª geração, cefamicinas, e não prevê a inibição pelo clavulanato. Conclusão: O fenótipo da cepa encontrada em A. aestiva expressa fortemente a resistência a antimicrobianos e revela como opções terapêuticas os carbapenêmico, aminoglicosídeos e as polimixinas. No entanto, esses antimicrobianos têm sido reservados para tratamento de humanos com infecções hospitalares. A presença do gene blaACT-16 classifica a cepa RG264 como patógeno crítico de prioridade 1 (5). Este dado aponta o risco de saúde animal e de saúde pública, destacando a importância da bioinformática na vigilância sanitária no contexto de uma só saúde.